PCR (polymeraasiketjureaktio) on ydinteknologia molekyylidiagnostiikassa. Sen pakkaus- ja testausprosessien standardointi vaikuttaa suoraan tulosten tarkkuuteen ja biofaktoihin. Tämä artikkeli tarjoaa ammatillisen näkökulman avainlaadunvalvontapisteistä koko PCR -testausprosessissa.
Näytteen vastaanotto ja esikäsittely ovat prosessin ensimmäiset vaiheet. Laboratorioiden on tarkasti tarkistettava näytteen tunnistaminen, kuljetusolosuhteet ja varastointiaika näytteen eheyden varmistamiseksi. Saatuaan näytteet on numeroitava ja rekisteröitävä bioturvallisuuskaapissa ja suoritettava pre - prosessointimenettelyt, kuten hajotus ja nukleiinihappouutto testityypin perusteella. Tässä vaiheessa vaaditaan kaksi - henkilön varmennusjärjestelmää estämään risti - saastuminen.
PCR -reaktiojärjestelmän valmistus on suoritettava puhtaassa penkissä. Operaattoreiden on käytettävä tason 3 suojalaitteita ja käytettävä nukleaasia - ilmaisia kulutustarvikkeita. Reagenssin valmistelu tarttuu "yksisuuntaiseen työnkulkuun" -periaatteeseen siirtymällä reagenssin valmistusalueelta näytteenkäsittelyalueelle ja sitten vahvistusalueelle. Negatiiviset kontrollit, positiiviset kontrollit ja sisäiset kontrollit on sisällytettävä jokaiseen reaktioerään kokeellisen pätevyyden seuraamiseksi.
Vahvistus- ja testausvaiheen aikana PCR -instrumentin on oltava pre - kalibroitu ja lämpötilan pyöräilyparametrit. Reaktiomenettely sisältää tyypillisesti kolme vaihetta: denaturointi (94 - 95 astetta), hehkutus (50-65 astetta) ja laajennus (72 astetta). Syklien lukumäärää säädetään havaitsemiskohteen perusteella. Reaaliaikainen fluoresenssi PCR vaatii myös tiettyjen kanavien fluoresenssisignaalin kynnyksen seurantaa.
Tulosanalyysi ja raportointi on suoritettava pätevien teknikkojen toimesta. Ainakin kahden ammattilaisen on tarkistettava raakatiedot vahvistamaan monistuskäyrän morfologia, CT -arvon uskottavuus ja laadunvalvontamateriaalien noudattaminen standardeilla. Loppuraportissa tulisi olla tietoja testimenetelmästä, tulosten tulkinnan perusta ja testirajoitusten lausunto.
Koko prosessi noudattaa tiukasti ISO 15189: tä ja asiaankuuluvia CDC -eritelmiä. Kolminkertainen takuujärjestelmä ympäristön seurannasta, laitteiden ylläpidosta ja henkilöstökoulutuksesta toteutetaan PCR -testauksen luotettavuuden ja jäljitettävyyden varmistamiseksi.